Sec14 Homologe der Hefe (Ost-West Pr.BfWV GZ. 457/1-III/B)

Das Genprodukt des SEC14 Gens der Hefe Saccharomyces cerevisiae ist an der Bildung sekretorischer Vesikel, an Lipidsynthese und Lipidabbau beteiligt. Gleichzeitig katalysiert Sec14p in vitro Lipidtransport zwischen künstlichen und natürlichen Membranen. Im Zuge der Hefegenom-Sequenzierung wurden fünf Sec14 Homologe, SFH1-5, identifiziert, die ebenfalls eine wichtige zellbiologische Funktion ausüben dürften. Im vorliegenden Projekt erfolgte die Charakterisierung dieser Sec14-Homologen der Hefe. Für zwei dieser Gene mit der Bezeichnung PDR16 (SFH3)und PDR17 (SFH4) konnten wir nachweisen, dass sie einerseits Drogenresistenz bewirken, andererseits eine regulatorische Rolle im Lipidmetabolismus spielen. Um SFH3 und SFH4 sowie die drei anderen SEC14 Homologen genauer zu studieren, wurden Deletionsmutanten und Stämme, die Sec14p bzw. dessen Homologe überexprimieren, konstruiert und Untersuchungen zum Lipidstoffwechsel und zur Proteinsekretion vorgenommen. Komplementationstests zeigten die Wechselbeziehung der Genprodukte der Sec14-Homologen untereinander und mit Sec14p. Die subzelluläre Lokalisierung der entsprechenden Proteine zeigte eine Korrelation zwischen funktionellen Eigenschaften der Proteine und Zellstruktur. Molekularbiologische und biochemische Experimente führten zu der Erkenntnis, dass SFH2 und SFH4 Regulatoren des Lipidabbaus sind. Durch diese Untersuchungen konnte das Zusammenwirken der Sec14 Genfamilie bei der Regulation zellulärer Prozesse nachgewiesen werden.